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產品名稱:

AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)

產品型號: AML12
產品時間: 2025-05-19
描述:AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)
AML12 小鼠肝細胞介紹
AML12細胞從一只轉入人TGF alpha的轉基因小鼠肝實質細胞獲得。該細胞表達較高水平的人TGF alpha 以及較低水平的鼠TGF alpha。肝臟特異性蛋白的表達隨著培養(yǎng)時間的延長而降低,但是可在無血清培養(yǎng)基中重新激活。

產品介紹

AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
AML12細胞從一只轉入人TGF alpha的轉基因小鼠肝實質細胞獲得。該細胞表達較高水平的人TGF alpha 以及較低水平的鼠TGF alpha。肝臟特異性蛋白的表達隨著培養(yǎng)時間的延長而降低,但是可在無血清培養(yǎng)基中重新激活。

細胞特性
1)來源:小鼠肝臟
2)形態(tài):上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

(1)使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。

(2)收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用。
                       
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備DMEM: Ham's F12(1:1)培養(yǎng)基(添加0.005 mg/ml 牛胰島素, 0.005 mg/ml 轉鐵蛋白, 5 ng/ml 硒, 以及 40 ng/ml 地塞米松),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
               細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養(yǎng)技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

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